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网站首页技术支持 ◇ 免疫亲和柱有着怎样的使用要点?
免疫亲和柱有着怎样的使用要点?
  • 发布日期:2022-01-14      信息来源:本站      浏览次数:325
    •    免疫亲和柱的原理:

        本实验测定的基础是抗原抗体间的特异性反应。单克隆抗体被偶联在柱内凝胶上,样品中的经过提取、过滤、稀释;然后将样品提取液通过键合有抗体的亲和柱。
      此时,键合在亲和柱中的抗体上。之后用蒸馏水将亲合柱上的杂质除去。用甲醇洗脱亲和柱,将从抗体上分离下来。将过滤的甲醇溶液注入荧光计或HPLC进行测定。
       
        特点:
        1、采用定向偶联技术,抗体载量大,有效柱容量高。所有亲和柱产品柱容量均满足国标对于商品化柱容量的要求;
       
        2、凝胶粒径均匀,过柱自然流速即可,不需额外加压;
       
        3、采用抗体定向偶联技术,样本回收率高;
       
        4、操作简便,可洗脱后直接进样,无需氮吹。
       

      免疫亲和柱

       

        免疫亲和柱的使用要点:
        1、上柱的样品溶液应该保持酸碱中性、无悬浮物、甲醇浓度不宜过高;
       
        2、若样品为复杂样品,例如高蛋白、高油脂、酸性样品,可以将提取液分两次提取样品,可以提高提取效果;
       
        3、样品过柱及甲醇洗脱速度要慢且均匀,约每秒1-2滴;
       
        4、抗原抗体发生反应的最佳温度是在25℃左右,实验需要的环境温度最好是室温24℃-28℃,太高或太低的温度都会对回收率有一定的影响。在使用前需要恢复至室温再进行实验;
       
        5、不要在无水状态下,琼脂容易干燥萎缩,影响质量;
       
        6、储存条件为4℃-8℃。切记0℃以下的低温,因为缓冲液冻结,会严重影响亲和柱内的物理结构,对质量影响很大;
       
        7、洗脱一般选择试剂甲醇,为增强洗脱效果可加大甲醇体积;
       
        8、样液免疫净化后,洗脱液过0.45um或更小孔径滤膜效果更好。

    北京迪科马科技有限公司(迪马科技)

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