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液相色谱柱的分类有哪些
发布时间:2019-07-03   点击次数:264次
液相色谱仪由高压液体泵分离系统、检测器及液相色谱柱(含柱温控制系统)等三部分组成。其中液相色谱柱是液相色谱工作的关键,液相色谱柱的性能直接关系到分离分析的准确性与适用性。

液相色谱柱的分类方法很多,可按键合相类型、用途(分析型与制备型)、基质种类等进行分类。

 

1 、硅胶基质柱(4大类)

目前,分析型液相色谱柱多为硅胶基质柱,细分为:

高纯硅胶柱:以高纯度硅烷化硅胶(Silica)为填料,应用范围较广,但只能在PH2.0-7.5,小于60度的条件下使用。又由于强极性硅羟基(Si-OH)的次级保留效应较强,所以应用受到局限,已被键合相柱所取代。

反相硅胶柱:是以硅烷化硅胶为基质,表面键合弱极性官能团的固定相。目前多用C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(phenyl,苯基)等。用于分离大多数有机化合物,应用范围最广。

正相硅胶柱:是以硅烷化硅胶为基质,表面键合极性官能团的固定相。目前较多的为:NH2—(氨基)、CN—(氰基)、DIOL(二羟基,也常做HILIC单独分类列出,多用于分离有机酸、蛋白质等)。多用于分离光学异构体和反相柱子不能分离的极性比较大的物质。

离子交换柱:是以硅烷化硅胶为基质,以磺化交联键合强阳/阴离子基团(磺酸盐/季铵碱)的固定相,又分为强酸性、强碱性、弱酸性、弱碱性等不同规格。用于分离解离性较强的有机盐类化合物。(注意:不要同离子色谱混淆,离子色谱主要是分离无机盐类化合物或某些带点离子。)

 

2、聚合物基质柱

聚合物基质柱是指采用聚苯乙烯—二乙烯基苯、聚甲基丙烯酸脂、多孔性微球蛋白等聚合物凝胶作为主要填料的一类色谱柱。其相对于硅胶柱具有更强的疏水性及更宽泛的pH范围(1.0~14.0),但柱效较低,目前主要应用于凝胶渗透色谱(GPC)、凝胶过滤色谱(GFC)及分子排阻色谱(MEC)。主要用于分离蛋白质类等大分子化合物。
 

3、其他无机物填料柱

这类色谱柱仅限于特殊用途,主要有石墨化碳、氧化铝(Al2O3)、氧化锆(ZrO2)等填料。不需要进行表面改性,其自身表面即可对各类化合物有强保留。可在任意pH(氧化铝除外,不能大于12.0)及高温度(可达100℃)下使用。其中,石墨化碳填料柱能分离多种化合物,主要用于分离几何异构体;氧化铝柱刚性强,柱床稳定,可分离多种化合物且多用于制备色谱;氧化锆柱较氧化铝柱有更强的pH适用范围及能耐受更高的温度,但其应用尚待进一步研究。
 

 

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