分析色谱柱的使用：
使用预柱保护分析柱（硅胶在极性流动相/离子性流动相中有一定的溶解度）；
大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2－8，尽量不超过该色谱柱的pH范围；
避免流动相组成及极性的剧烈变化；
流动相使用前需经脱气和过滤处理；
压力升高是需要更换预柱的信号。
分析色谱柱的污染后的清洗和再生要这样做！
当柱子被污染，它的色谱行为和没被污染的柱子会有些不同。被污染的柱子能产生反压问题。被污染的反相柱子必须清洗和再生才能恢复原来的操作条件。
再生被污染HPLC柱子的关键是知道污染物的性质并且能找到适当的溶剂来去除。如果污染是因为重复进样时强保留物质的累积引起的，利用简单的步骤来除去这些污染物往往能恢复其色谱行为。有时候，经过多次操作以后的色谱柱用双溶剂反相系统中较强的溶剂冲洗20个体积可以清除污染物。
一般来说，所有的清洗方法都有类似的形式。所用的溶剂都是随溶剂强度增加，经常最后一个溶剂是非常疏水的（如醋酸乙酯甚至是烃），可以用来溶解非极性物质如脂质和油类。我们保证一系列溶剂中每个溶剂都能与下一个溶剂互混。清洗过程要结束时，必须借助一个中等强度能互混的溶剂而回到原始溶剂系统。例如，异丙醇是一个非常好的作为中间步骤的溶剂，因为它能与正己烷或二氯甲烷互溶又能与水相溶剂互溶。但是异丙醇粘度非常大，必须确保较低的流速以免使泵压过高。冲洗色谱柱时，冲洗液由色谱柱出液端直接接入废液瓶，不能流经检测池，以免检测池被污染。
