免疫亲和柱的原理：
本实验测定的基础是抗原抗体间的特异性反应。单克隆抗体被偶联在柱内凝胶上，样品中的经过提取、过滤、稀释；然后将样品提取液通过键合有抗体的亲和柱。
此时，键合在亲和柱中的抗体上。之后用蒸馏水将亲合柱上的杂质除去。用甲醇洗脱亲和柱，将从抗体上分离下来。将过滤的甲醇溶液注入荧光计或HPLC进行测定。
特点：
1、采用定向偶联技术，抗体载量大，有效柱容量高。所有亲和柱产品柱容量均满足国标对于商品化柱容量的要求；
2、凝胶粒径均匀，过柱自然流速即可，不需额外加压；
3、采用抗体定向偶联技术，样本回收率高；
4、操作简便，可洗脱后直接进样，无需氮吹。
免疫亲和柱的使用要点：
1、上柱的样品溶液应该保持酸碱中性、无悬浮物、甲醇浓度不宜过高；
2、若样品为复杂样品，例如高蛋白、高油脂、酸性样品，可以将提取液分两次提取样品，可以提高提取效果；
3、样品过柱及甲醇洗脱速度要慢且均匀，约每秒1-2滴；
4、抗原抗体发生反应的最佳温度是在25℃左右，实验需要的环境温度最好是室温24℃-28℃，太高或太低的温度都会对回收率有一定的影响。在使用前需要恢复至室温再进行实验；
5、不要在无水状态下，琼脂容易干燥萎缩，影响质量；
6、储存条件为4℃-8℃。切记0℃以下的低温，因为缓冲液冻结，会严重影响亲和柱内的物理结构，对质量影响很大；
7、洗脱一般选择试剂甲醇，为增强洗脱效果可加大甲醇体积；
8、样液免疫净化后，洗脱液过0.45um或更小孔径滤膜效果更好。
