HILIC色谱柱是亲水相互作用色谱柱,其保留模式类似于正相,同时又突破了正相模式的溶剂局限。
分离原理:采用反相流动相体系,而按照正相顺序出峰。通过亲水性相互作用,可有效的HILIC色谱柱中因保留能力弱而难分离的强极性化合物。
常见的可分离的样品:糖类,人参皂苷,多肽等在C18柱上保留较差的样品。
HILIC色谱柱与C18柱的比较
亲水相互作用色谱属于正相色谱。它与反相色谱有着相反的作用方式:亲水性低(疏水性强)的化合物将会先被溶出。使用C18柱分析亲水性化合物时,一般都要使用离子对试剂。而由于HILIC不需使用任何离子对试剂,所以由离子对试剂引起的平衡时间长,色谱柱劣化加快,流动相调制复杂等诸多问题都将不复存在。另外,HILIC的固定相三唑基具有阴离子交换作用,此作用对酸性化合物有较强的保留能力。
HILIC色谱柱的保存方法
使用之后,应使用体积比为7:3的乙腈和水进行冲洗,清除掉所有的缓冲盐。
然后,使用100%的异丙醇、以更低的流速进行冲洗,以便贮存。应往回拧紧色谱柱端盖(拧紧色谱柱端盖),并将色谱柱放回盒内。
每次分析运行之后,除非第二天要使用,否则建议采用密闭法(按长期保存的方法)清洗色谱柱,然后用异丙醇冲洗。