共创共赢
左旋肉碱 (L-carnitine)，又称L-肉碱或维生素BT，是一种促使脂肪转化为能量的类氨基酸，可作为一种营养强化剂添加到食品中。2025年，国家市场监督管理总局，国家卫生健康委员会发布了GB 5009.300-2025《食品安全国家标准 食品中左旋肉碱的测定》。本标准代替GB 29989-2013《食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》。
新版标准主要变化如下：扩大了方法的适用范围，增加了第二法柱前衍生-高效液相色谱法和第三法液相色谱-串联质谱法。其中第三法规定使用强阳离子交换色谱柱(3.0mm×50mm，5μm)或性能相当者，迪马科技采用Diamonsil® Plus SCX(Cat.#:99458)，强阳离子交换色谱柱(3.0mm×50mm，5μm)建立了左旋肉碱的检测方法，线性范围10.0ng/mL-5000ng/mL，R2=0.999，满足国标需求。
样品制备
左旋肉碱标准工作液:分别吸取左旋肉碱标准储备液(20mg/mL)0.005mL、0.01mL、0.25mL、1.00mL、2.00mL、2.50mL置于10mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀，即得。该系列标准工作液质量浓度分别为10.0μg/mL、20.0μg/mL、500μg/mL、2000μg/mL、4000μg/mL、5000μg/mL。
左旋肉碱标准工作液(10.0μg/mL、20.0μg/mL)需临用现配；左旋肉碱标准工作液(500μg/mL、2000μg/mL、4000μg/mL、5000μg/mL)需4°C避光保存，有效期3个月。
同位素内标溶液(200μg/mL):准确称取10mg(精确至0.1mg)左旋肉碱-d3置于10mL烧杯中，加入5mL水溶解，全部转移至50mL容量瓶中，用水定容至刻度，混匀。将溶液转移至棕色容器中，4°C避光保存，有效期3个月。
左旋肉碱系列标准工作液:分别吸取上述各浓度的左旋肉碱标准工作液50.0μL于微波消解罐中加入50.0μL同位素内标溶液、5mL水和2.5mL，硝酸，涡旋混匀，旋紧罐盖，置微波消解仪中进行提取(10min升至120℃，保持40min，最大功率1000W)。冷却后取出，缓慢打开罐盖排气，用水稀释至25mL，混匀，用0.22μm微孔滤膜过滤，备用。吸取滤液0.50mL，加人乙腈0.50mL，混匀，供液相色谱-串联质谱仪测定。该系列标准工作液质量浓度分别为10.0ng/mL、20.0ng/mL、500ng/mL、2000ng/mL、4000ng/mL、5000ng/mL。该系列标准工作液质量浓度分别为10.0ng/mL、20.0ng/mL、500ng/mL、2000ng/mL、4000ng/mL、5000ng/mL。
UPLC分析条件：
色谱柱：Diamonsil® Plus SCX 3.0mm×50mm,5μm(Cat.#:99458)
进样量：1μL
柱温：40℃
流动相：A-5mmol/L甲酸铵乙腈-水溶液(含0.2%甲酸)
B-30mmol/L甲酸铵乙腈-水溶液(含0.2%甲酸)
流速：1.0mL/min
实验结果
图1 左旋肉碱-d3典型谱图
图2 左旋肉碱典型谱图
图3 左旋肉碱标准曲线
小结
使用我司色谱柱Diamonsil® Plus SCX 3.0mm×50mm，5μm(Cat.#:99458)分析不同浓度左旋肉碱标准溶液（10.0ng/mL-5000ng/mL），R2 = 0.999。线性范围良好，满足GB 5009.300-2025国标需求。
下载方案