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极性改性反相色谱柱的日常维护
  • 发布日期:2014-10-13      信息来源:本站      浏览次数:1466
    • 极性改性反相色谱柱的日常维护

      正确使用缓冲盐
      缓冲盐通常易溶于水,难溶于有机溶剂,因此缓冲盐使用不当会使其析出,堵塞填料基质上的微孔和颗粒间的空隙,使填料板结,柱压上升;同时阻碍了基质上键合的碳链自由舒展,使色谱柱的保留能力下降,柱效降低。缓冲盐析出后,去除非常困难,因此,正确的使用缓冲盐对延长色谱柱使用寿命非常重要。
      正确使用缓冲盐的目的是防止缓冲盐析出,因此正确使用缓冲盐的方法可归结为一句话:使用前要过渡,使用后要冲洗。具体方法如下:     
      1. 等度条件:使用缓冲盐前需用过渡流动相以1.0ml/min流速冲洗30min,
      使用后去除缓冲盐的另一个方法是用过渡流动相以0.2ml/min流速冲洗
      色谱柱过夜。
      2. 梯度条件:用含有缓冲盐的流动相跑梯度之前,用与初始流动相组成相同的过渡流动相以1.0ml/min流速冲洗30min;分析完成后,再用该过渡流动相以1.0ml/min冲洗色谱柱45min。含缓冲盐流动相的梯度设定应尽量平缓,以避免梯度过程中缓冲盐析出。
      注意:过渡流动相是指有机相和水相的组成与分析流动相相同,区别只是过渡流动相中不含缓冲盐。
      3. 缓冲盐析出的补救方法:
         1)方案1:用甲醇/水=20/80以1.0ml/min流速35℃条件下反向冲洗色谱柱120min;
         2)方案2:用甲醇/水=20/80以0.2ml/min流速反向冲洗色谱柱过夜。

    北京迪科马科技有限公司(迪马科技)

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