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色谱柱的使用和维护事项分析
  • 发布日期:2019-08-06      信息来源:本站      浏览次数:1151
    •   色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70 bar时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。还有使用熔融硅或玻璃衬里的,用于细管柱。色谱柱两端的柱接头内装有筛板,孔径0.2-20μm(5-10μm),取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。

        在日常分离分析工作中,色谱柱的正确使用和维护十分重要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。
       

        (1)柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。

        (2)如果用来做常规分析,样品种类有限,但分析次数多,则不妨为每一类常规分析配置一根柱,这样有助于延长柱子的寿命。

        (3)避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。

        (4)应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。

        (5)如使用柱温控制装置时,应注意在通入流动相后才能升温。

        (6)一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会轻则降低柱效,重则填料流失,色谱柱损坏。

        (7)选择使用适宜的流动相,以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一个保护柱,保护柱填料要与色谱柱保持一致,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。

        (8)避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。

        (9)经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右。

        (10)保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,防止长菌。柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥,禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。

        (11)色谱柱使用过程中,如果压力升高,一种可能是烧结滤片被堵塞,这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进入柱内,使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。

        (12)在完成分离分析工作之后,不应立即停机,需及时对色谱分析系统进行冲洗,以除去色谱柱内的杂质。

       

    北京迪科马科技有限公司(迪马科技)

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