共创共赢
调味品、豆制品、肉制品等食品中
二甲基黄、二乙基黄的测定
参考BJS 202505 《调味品、豆制品、肉制品等食品中红2G、二甲基黄、二乙基黄的测定》
二甲基黄与二乙基黄属于禁用偶氮类工业染料，被国际癌症研究机构列为2B类致癌物，长期摄入可损伤肝肾、存在健康风险，我国已明确禁止用于食品加工。部分不法商贩受利益驱使，违规将其添加于肉制品、豆制品、香辛料中，用以改善色泽、掩盖原料缺陷，严重威胁食品安全。
传统检测方法以高效液相色谱法为主，在复杂基质中易受干扰，定性准确性与灵敏度难以满足痕量筛查需求。液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)凭借高分离能力、高特异性与高灵敏度，可实现多反应监测(MRM)精准定性定量，成为非法染料检测的核心技术。
依据BJS 202505食品补充检验方法，本研究采用乙腈提取结合分散固相萃取净化ProElut® PMR QuEChERS(Cat.#:64767)，选用色谱柱Endeavorsil® C18 150mm x 3.0mm，1.8μm(Cat.#:87008)实现目标组分高效分离，建立LC-MS/MS同时测定二甲基黄与二乙基黄的方法，优化前处理与质谱参数，弥补常规方法在复杂食品基质中检测短板，为食品安全监管、风险预警与市场整治提供精准高效的技术支撑，筑牢食品安全检测防线。
本方案适用于火腿、豆腐丝、鸡精、白胡椒等食品中二甲基黄、二乙基黄的测定，定量限为2μg/kg。
(1) 二甲基黄、二乙基黄混标储备液：溶于乙腈，浓度为500μg/mL(Cat.#:49137)；
(2) 混标工作液 I：量取定量储备液，用乙腈溶解，配置成浓度为1μg/mL工作液；
(3) 混标工作液 II：量取定量工作液I，用乙腈溶解，配置成浓度为0.1μg/mL工作液；
(4) 二甲基黄、二乙基黄基质标准工作溶液：称取空白基质2g，置于50mL离心管中，精密加入适量混标工作液，按照步骤3进行前处理，步骤4进行净化。
称取2g样品于50mL离心管中，加入10mL乙腈，涡旋混匀1min，超声10min，10000r/min离心10min，转移上清液至20mL容量瓶中；残渣再加5mL乙腈，重复提取一次，上清液转移至同一容量瓶中，用乙腈定容至刻度，混匀，待净化。
ProElut® QuEChERS (Cat.#:64767)
向装有QuEChERS净化粉的离心管中加入2mL水，涡旋混匀活化后，精密吸取10mL提取液，加入到该离心管，涡旋1min，3700r/min离心5min，取上清加入到装有1.5g无水硫酸镁和0.5g氯化钠的离心管中，涡旋1min，3700r/min离心5min，取上清液至氮吹管中，40℃氮吹浓缩至近干，精密加入1mL 50%乙酸铵乙腈溶液复溶，过0.22μm PTFE 滤膜(Cat.#:30104)，上机分析。
UPLC条件
色谱柱: Endeavorsil® C18，150x3.0mm，1.8μm (Cat.#87008)
流速：0.3mL/min
进样量：2μL
柱温：40℃
流动相：A: 10mmol/L乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸) B: 乙腈
质谱条件
电离模式: ESI
扫描方式: 正离子扫描
检测方式: 多反应监测
电喷雾电压: 5500V
雾化气压力: 50psi
辅助气压力: 50psi
气帘气压力: 20psi
离子源温度: 500℃
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