共创共赢
合成着色剂因其色彩亮丽、性质稳定、价格低廉，成为食品工业常用的添加剂之一。它们通常是以苯、甲苯、萘等化工原料合成，长期食用对人体健康具有一定的毒性，尤其是对少年儿童。世界各国对合成着色剂的使用范围和*都有严格的规定，《GB 2760-2014 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准》中准许使用的人工合成色素也有严格规定。我国也有很多检测着色剂的相关标准，采用不同的净化方法，包括C18柱净化、聚酰胺粉净化等，C18净化方法仅仅适用于水果罐头，而聚酰胺粉净化方法过程比较繁琐。
对比国标方法本方案具有：
前处理步骤简单、回收率高、方法稳定性好、净化效果优异等特点；
采用了迪马科技的ProElut PWA-2，可以保证实验结果的重现性和准确性；
过柱方法简单易操作，对操作人员要求不高，检测成本相对较低，能被很多企事业单位采用；
可同时检测8种人工合成着色剂，检出限：亮蓝为1.0 mg/kg，其他均为0.2 mg/kg，符合国家标准要求。
ProElut PWA-2吸附剂采用弱阴离子交换机理去除杂质，同时对着色剂没有不可逆的吸附，保证了样品的净化效果及回收率；本产品是商品化的成品柱，吸附剂稳定性好，不受外界环境因素影响，保证实验结果的重现性和准确性；过柱过程操作步骤简单，节省时间，提高了工作效率。
以下为详细解决方案，敬请参考！
1、适用范围
本方案适用于糕点、果酱、水果罐头、黑芝麻糊、果冻、冰淇淋、乳饮料、糖果和红酒中人工合成着色剂的检测；检出限：亮蓝为1.0 mg/kg，其余均为0.2 mg/kg；
2、提取
2.1 糕点、果酱
取1.0 g样品，加入20 mL提取液A*，振荡2 min，40 ℃水浴超声提取10 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；
取下层残留物，加入10 mL提取液A*，振荡2 min，40 ℃水浴超声提取15 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；
将下层残留物用10 mL提取液A* 按照步骤(2)重复提取一次，合并三次上清液；
将上清液在40 ℃水浴条件下，减压蒸至约15 mL，再加入3 mL甲酸混匀，待净化。
2.2 水果罐头、黑芝麻糊
取1.0 g样品，加入20 mL提取液A*，振荡2 min，40 ℃水浴超声提取10 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；
取下层残留物，加入10 mL提取液A*，振荡2 min，40 ℃水浴超声提取15 min，6000 rpm下离心2 min，合并两次上清液；
将上清液在40℃水浴条件下，减压蒸至约15 mL，再加入3 mL甲酸混匀，待净化。
2.3 冰淇淋
取1.0 g样品，加入20 mL提取液A*，振荡2 min，40 ℃水浴超声提取10 min，6000 rpm下离心2 min，收集上清液；
将上清液在40 ℃水浴条件下，减压蒸至约15 mL，再加入3 mL甲酸混匀，待净化。
2.4 果冻
取1.0 g样品，加入10 mL水，40 ℃水浴超声提取15 min，加入5 mL甲醇和3 mL甲酸混匀，待净化。
2.5 乳饮料、糖果
取1.0 g样品，加入10 mL水、5 mL甲醇和3 mL甲酸混匀，待净化。
2.6 红酒
取1.0 mL样品，加入0.5 mL甲醇和0.3 mL甲酸混匀，待净化。
*提取液A：取100 mL乙醇和50 mL乙腈，混匀，取140 mL乙醇：乙腈（2：1）混合溶液，加入60 mL水和2 mL氨水，混匀。
3、净化——ProElut PWA-2 150 mg/6 mL（Cat.# 65815）
a活 化： | 依次用5 mL甲醇、5 mL10%甲酸水活化； |
b上 样： | 加入待净化液，弃去流出液； |
c淋 洗： | 加入5 mL甲醇，弃去流出液； |
d洗 脱： | 加入5 mL 15%氨水甲醇溶液，收集流出液； |
e重新溶解： | 将洗脱液在50 ℃下氮吹至约300 μL，用流动相定容至1 mL，供HPLC分析。 |
4、色谱条件
色谱柱：Inspire C18，250 × 4.6 mm，5 μm（Cat.# 81006）
流 速：1.0 mL/min
进样量：20 μL
柱 温：35 ℃
检测器：PDA 254 nm
流动相：A：乙腈 B：0.02 mol/L 乙酸铵溶液
梯度设置
时间（min） | 0 | 20 | 30 | 31 | 40 |
A（%） | 5 | 30 | 37 | 5 | 5 |
B（%） | 95 | 70 | 63 | 95 | 95 |
5、添加回收结果
柠檬黄 | 新红 | 苋菜红 | 靓蓝 | 日落黄 | 诱惑红 | 亮兰 | 赤藓红 | |
糕点 | 97.45 | 95.47 | 92.80 | 92.70 | 97.69 | 99.77 | 87.80 | 91.38 |
果酱 | 96.79 | 95.31 | 94.21 | 94.07 | 95.23 | 98.36 | 93.91 | 92.55 |
果冻 | 107.12 | 101.29 | 103.29 | 96.04 | 103.18 | 103.96 | 100.36 | 93.87 |
冰淇淋 | 99.55 | 97.66 | 106.98 | 93.44 | 101.45 | 102.22 | 100.16 | 97.13 |
乳饮料 | 100.37 | 96.55 | 83.23 | 96.26 | 99.70 | 101.48 | 102.00 | 94.35 |
糖果 | 98.41 | 98.61 | 95.47 | 94.83 | 99.93 | 99.02 | 95.28 | 94.26 |
水果罐头 | 97.64 | 100.40 | 98.66 | 94.47 | 99.51 | 100.09 | 100.77 | 99.21 |
黑芝麻糊 | 101.51 | 105.56 | 92.76 | 96.07 | 106.67 | 103.43 | 114.44 | 99.55 |
红酒 | 97.34 | 96.19 | 97.63 | 88.29 | 97.82 | 96.64 | 96.87 | 96.17 |
食品中人工合成着色剂的HPLC检测（添加水平10 mg / kg）的添加回收结果
人工合成着色剂标准(10 mg/L)液相色谱图
添加水平为10 mg/kg糕点中人工合成着色剂检测的液相色谱图
糕点中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
添加水平为10 mg/kg果酱中人工合成着色剂检测的液相色谱图
果酱中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
添加水平为10 mg/kg果冻中人工合成着色剂检测的液相色谱图
果冻中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
添加水平为10 mg/kg冰淇淋中人工合成着色剂检测的液相色谱图
冰淇淋中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
添加水平为10 mg/kg乳饮料中人工合成着色剂检测的液相色谱图
乳饮料中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
添加水平为10 mg/kg糖果中人工合成着色剂检测的液相色谱图
糖果中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
添加水平为10 mg/kg水果罐头中人工合成着色剂检测的液相色谱图
水果罐头中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
添加水平为10 mg/kg黑芝麻糊中人工合成着色剂检测的液相色谱图
黑芝麻糊中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
添加水平为10 mg/kg红酒中人工合成着色剂检测的液相色谱图
红酒中人工合成着色剂检测(空白样品)的液相色谱图
食品中人工合成着色剂的测定相关产品信息：
货号 | 名称 | 规格 |
样品前处理 | ||
65815 | 若阴离子交换固相萃取柱 ProElut PWA-2 | 150 mg/6 mL, 30/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取装置 | 12位 |
4803 | 1,3,6mL柱管通用连接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正压两用泵，无油 | 1/pk |
99013 | 抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞) | 1/pk |
30039 | FitMax针头式过滤器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 | FitMax针头式过滤器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
标准品 | ||
56-03322-25MG | 酒石黄/柠檬黄[1934-21-0] | 25mg ≥99.0% (HPLC) |
56-87612-25MG | 苋菜红[915-67-3] | 25mg ≥98.0% (HPLC) |
54-229296-25G | 靛蓝[482-89-3] | 25g Dye content, 95% |
50P-C15506000 | 新红[220658-76-4] | 100 mg |
56-68775-25MG | 日落黄[2783-94-0] | 25mg ≥95% (HPLC) |
50P-C10665200 | 亮蓝[3844-45-9] | 250 mg |
56-87613-25MG | 赤藓红/藻红[16423-68-0] | 25mg ≥98.0% (HPLC) |
56-38213-25MG | 诱惑红[25956-17-6] | 25mg ≥98.0% (HPLC) |
色谱柱及保护柱 | ||
81006 | 反相液相色谱柱 Inspire C18 | 250 × 4.6 mm, 5 μm |
6201 | EasyGuard C18 保护柱 | 10 × 4.0 mm 1/pk 2个柱芯+1个柱套 |
HPLC溶剂?缓冲盐?离子对试剂 | ||
50102 | 甲醇 HPLC级 | 4 L |
50101 | 乙腈 HPLC级 | 4 L |
50108 | 乙醇 HPLC级 | 4 L |
50144 | 甲酸 HPLC级 | 50 mL |
50138 | 乙酸铵 HPLC级 | 100 g |
通用色谱产品 | ||
52401B | 瓶架/蓝色（现货） | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色（现货） | 50孔 |
1034 | 样品瓶（棕色/螺纹） | 2 mL, 100/pk |
1035 | 样品瓶盖/含垫（已经组装） | 100/pk |
H80465 | HPLC 进样针 | 25 μL |
红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035*
