共创共赢
维生素D（vitaminD）为固醇类衍生物，具抗佝偻病作用，又称抗佝偻病维生素。维生素D家族成员中zui重要的成员是D2和D3。虽然日常膳食可补充部分维生素D，但仍有相当一部分人面临着维生素D摄入不足的问题，各种人为添加维生素D的食品便应运而生。因此，准确测定各种食品中的维生素D含量显得非常重要，科研工作者也一直在努力寻找合适的测定方法来得到准确、重现性好的结果。
迪马科技应用实验室采用ProElutVDC维生素D2、D3固相萃取柱进行前处理净化，DiamonsilC18（2）液相色谱柱成功实现米粉中维生素D2、D3的分离、测定，具有分析结果准确，重现性好的特点。
样品准备
（1）取1g样品，加入10mL水，充分混匀；
（2）加入1mL二甲基亚砜、5mL甲醇和20mL正己烷：甲基叔丁基醚=1：2，涡旋混合2min，6000rpm离心2min，收集上清液；
（3）向下层残渣中依次加入1mL二甲基亚砜、5mL甲醇和10mL正己烷：甲基叔丁基醚=1：2，重复提取两次，合并三次提取上清液；
（4）将上清液在40℃下减压蒸至近干，待净化。
SPE柱净化——ProElutVDC2g/12mL（Cat.#：65358）
| （1）活化： | 依次向柱中加入10 mL乙酸乙酯、10 mL正己烷，弃去流出液； |
| （2）上样： | 再用5 mL正己烷分两次洗涤旋蒸瓶并加入柱中，弃去流出液； |
| （3）淋洗： | 依次向柱中加入10mL正己烷、10 mL10%乙酸乙酯正己烷,弃去流出液； |
| （4）洗脱： | 向柱中加入20 mL 10%乙酸乙酯正己烷，收集流出液； |
| （5）重新溶解： | 将洗脱液在40 ℃减压蒸至近干，用甲醇定容至1 mL，供HPLC分析。 |
| 色谱柱： | Diamonsil C18(2),250mm×4.6mm,5μm（Cat# 99603） |
| 流 速： | 1.0 mL/min |
| 检测器： | UV 264 nm |
| 柱 温： | 30 ℃ |
| 进样量： | 20 μL |
| 流动相： | 甲醇 |
| 目标化合物 | 维生素D2 | 维生素D3 |
| 回收率（%） | 84.69 | 87.42 |
米粉中维生素D2、D3（添加水平2.0mg/kg）色谱图
米粉中维生素D2、D3（空白）色谱图
米粉中维生素D2、D3的检测相关产品信息：
| 货号 | 名称 | 规格 |
| 样品前处理 | ||
| 65358 | 维生素D2、D3检测柱 | 2 g/12 mL,20/pk |
| ProElut VDC | ||
| 244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取装置 | 12位 |
| 4806 | 考克（控制流量） | 15/pk |
| 99011 | 真空/正压两用泵，无油 | 1/pk |
| 99013 | 抽滤瓶套装 | 1/pk |
| （包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞） | ||
| 37177 | 针头式过滤器 Nylon | 13 mm,0.22μm 100/pk |
| 37180 | 针头式过滤器 Nylon | 13 mm,0.45μm 100/pk |
| 色谱柱及保护柱 | ||
| 99603 | 通用型反相液相色谱柱 | 250×4.6 mm,5μm |
| Diamonsil C18（2） | ||
| 6201 | EasyGuard保护柱套装 | 1个柱套+2个柱芯 |
| 10 × 4.0 mm | ||
| 标准品 | ||
| 12-N-V17-100MG | 维生素D2[50-14-6] | 100 mg |
| 12- N-11463-100MG | 维生素D3[67-97-0] | 100 mg |
| HPLC溶剂缓冲盐离子对试剂 | ||
| 50102 | 甲醇HPLC级 | 4 L |
| 50104 | 乙酸乙酯HPLC级 | 4 L |
| 50115 | 正己烷HPLC级 | 4 L |
| 50119 | 二甲基亚砜HPLC级 | 4 L |
| 50123 | 甲基叔丁基醚HPLC级 | 4 L |
| 通用色谱产品 | ||
| 52401B | 瓶架/蓝色 | 50 孔 |
| 52401A | 瓶架/白色 | 50孔 |
| 5323 | 样品瓶（棕色/螺纹） | 2 mL,100/pk |
| 5325 | 样品瓶盖/含垫（已经组装） | 100/pk |
| H80465 | HPLC 进样针 | 25 μL |
