米粉中维生素D2、D3的检测-北京迪科马科技有限公司（迪马科技）

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米粉中维生素D2、D3的检测

发布日期：2013-05-20 信息来源：本站浏览次数：2549

维生素D（vitamin D）为固醇类衍生物，具抗佝偻病作用，又称抗佝偻病维生素。维生素D家族成员中zui重要的成员是D2和D3。虽然日常膳食可补充部分维生素D，但仍有相当一部分人面临着维生素D摄入不足的问题，各种人为添加维生素D的食品便应运而生。因此，准确测定各种食品中的维生素D含量显得非常重要，科研工作者也一直在努力寻找合适的测定方法来得到准确、重现性好的结果。

迪马科技应用实验室采用ProElut VDC维生素D₂、D₃固相萃取柱进行前处理净化，Diamonsil C18（2）液相色谱柱成功实现米粉中维生素D₂、D₃的分离、测定，具有分析结果准确，重现性好的特点。

样品准备

（1）取1 g样品，加入10 mL水，充分混匀；

（2）加入1 mL二甲基亚砜、5 mL甲醇和20 mL 正己烷：甲基叔丁基醚=1：2，涡旋混合2 min，6000 rpm离心2 min，收集上清液；

（3）向下层残渣中依次加入1 mL二甲基亚砜、5 mL甲醇和10 mL 正己烷：甲基叔丁基醚=1：2，重复提取两次，合并三次提取上清液；

（4）将上清液在40 ℃下减压蒸至近干，待净化。

SPE柱净化——ProElut VDC 2 g/12 mL（Cat.#：65358）

（1）活化：	依次向柱中加入10 mL乙酸乙酯、10 mL正己烷，弃去流出液；
（2）上样：	再用5 mL正己烷分两次洗涤旋蒸瓶并加入柱中，弃去流出液；
（3）淋洗：	依次向柱中加入10 mL正己烷、10 mL10%乙酸乙酯正己烷，弃去流出液；
（4）洗脱：	向柱中加入20 mL 10%乙酸乙酯正己烷，收集流出液；
（5）重新溶解：	将洗脱液在40 ℃减压蒸至近干，用甲醇定容至1 mL，供HPLC分析。

分析条件

色谱柱：	Diamonsil C18（2），250 mm × 4.6 mm，5 μm（Cat# 99603）
流速：	1.0 mL/min
检测器：	UV 264 nm
柱温：	30 ℃
进样量：	20 μL
流动相：	甲醇

添加回收结果

米粉中维生素D₂、D₃（添加水平2.0 mg/kg）的添加回收结果

目标化合物	维生素D₂	维生素D₃
回收率（%）	84.69	87.42

维生素D₂、D₃ 标准溶液色谱图（2.0 mg/L）

米粉中维生素D₂、D₃（添加水平2.0 mg/kg）色谱图

米粉中维生素D₂、D₃（空白）色谱图

米粉中维生素D2、D3的检测相关产品信息：

货号	名称	规格
样品前处理
65358	维生素D2、D3检测柱 ProElut VDC	2 g/12 mL,20/pk
244358	12管防交叉污染真空SPE萃取装置	12位
4806	考克（控制流量）	15/pk
99011	真空/正压两用泵，无油	1/pk
99013	抽滤瓶套装（包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞）	1/pk
37177	针头式过滤器 Nylon	13 mm,0.22 μm 100/pk
37180	针头式过滤器 Nylon	13 mm,0.45 μm 100/pk
色谱柱及保护柱
99603	通用型反相液相色谱柱 Diamonsil C18（2）	250 × 4.6 mm, 5 μm
6201	EasyGuard保护柱套装	1个柱套+2个柱芯 10 × 4.0 mm
标准品
12-N-V17-100MG	维生素D2[50-14-6]	100 mg
12- N-11463-100MG	维生素D3[67-97-0]	100 mg
HPLC溶剂缓冲盐离子对试剂
50102	甲醇HPLC级	4 L
50104	乙酸乙酯HPLC级	4 L
50115	正己烷HPLC级	4 L
50119	二甲基亚砜HPLC级	4 L
50123	甲基叔丁基醚HPLC级	4 L
通用色谱产品
52401B	瓶架/蓝色	50 孔
52401A	瓶架/白色	50孔
5323	样品瓶（棕色/螺纹）	2 mL, 100/pk
5325	样品瓶盖/含垫（已经组装）	100/pk
H80465	HPLC 进样针	25 μL

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