固相萃取柱作为样品前处理的核心装置，其清洁程度直接影响目标物的回收率与检测结果准确性。科学的清洁流程需兼顾吸附剂特性、污染物性质及后续实验需求，以下从关键步骤展开详述。
一、清洁必要性
长期使用的萃取柱因样本基质残留(蛋白质、脂类、盐晶等)会导致柱床堵塞、交叉污染，表现为流速下降、峰形展宽甚至假阳性结果。定期深度清洁可恢复柱效，延长使用寿命。
二、标准化清洁流程
1. 正向冲洗
- 目的：清除柱内松散附着的弱保留物质。
- 操作：按“空白运行”模式通入初始流动相(如甲醇-水体系)，以设定流速持续冲洗，观察流出液澄清度。若出现浑浊，需延长冲洗时间直至无可见颗粒。
2. 反向冲洗
- 核心作用：逆向冲击剥离紧密吸附的顽固污染物。
- 实施要点：切换阀路使载流方向反转，选用高比例有机相(如纯甲醇或乙腈)，配合加压装置提升冲洗效率。注意监测背压变化，避免超过柱体耐压上限。
3. 梯度淋洗
- 适用场景：针对复杂污染物分层清除。
- 方案设计：从低强度溶剂(如5%甲醇/水)逐步过渡至高强度溶剂(如95%甲醇)，每个梯度停留足够时间使污染物充分解吸。对于离子型污染物，可添加少量酸碱调节剂(如0.1%甲酸铵)。
三、专项强化处理
- 疏水性杂质：采用非极性溶剂(正己烷、二氯甲烷)进行多次循环冲洗，利用相似相溶原理瓦解脂溶性残留。
- 蛋白沉积：配置含酶抑制剂的磷酸盐缓冲液(PBS)，结合超声震荡加速蛋白降解。
- 金属螯合物：使用EDTA络合溶液浸泡，破坏金属离子与吸附剂的结合位点。
四、再生与平衡
完成物理冲洗后，需用初始流动相重新平衡柱床，恢复固定相表面电荷分布。通过进样空白溶剂验证系统稳定性，确认无记忆效应后方可投入下次使用。
五、维护规范
- 频次控制：每分析完生物样品或高盐样品后立即执行简易冲洗；连续使用超20次需进行全面再生。
- 禁忌操作：严禁突然切换高粘度溶剂造成液压冲击；避免使用酮类溶剂溶解某些硅胶基填料。
- 报废标准：当理论塔板数下降30%以上或空白干扰峰显著增加时，应及时更换新柱。
六、安全警示
所有清洗过程应在通风橱内进行，佩戴防护手套与护目镜。收集的废液需分类储存，特别是含重金属或放射性同位素的洗涤液，须按危废处置规程处理。
科学合理的清洁方案可使单支萃取柱重复使用数十次，显著降低实验成本。操作者应根据实际污染情况灵活调整参数，并建立完整的清洗日志以便追溯优化。
