液相色谱柱的正确存放方式是确保其性能稳定、延长使用寿命的关键。不当的存放可能导致柱效下降、固定相损伤或污染，甚至造成不可逆的损坏。以下是关于液相色谱柱存放的详细指南，涵盖操作步骤、环境要求及注意事项。
一、使用后的预处理
1. 冲洗色谱柱
- 目的：清除残留样品、缓冲盐、杂质或腐蚀性溶剂，防止析出结晶或滋生微生物。
- 操作：
- 反相柱(C18等)：先用纯水冲洗10-15倍柱体积，再用甲醇或乙腈置换水分，最终保存于有机相(如甲醇:水=1:1或纯有机溶剂)。
- 正相柱(硅胶、氨基柱等)：用正己烷或异丙醇冲洗，避免接触水分。
- 离子交换柱：用高纯度水或低浓度盐溶液冲洗，去除高盐缓冲液。
- 注意：冲洗流速需低于分析流速(如0.5 mL/min)，避免压力冲击损伤填料。
2. 排除气泡并封端处理
- 冲洗后，用封端溶剂(如0.05% TFA或醋酸)低速冲洗，封闭硅胶表面残余硅羟基，减少碱性物质吸附。
- 排出柱内气泡，确保填料浸润溶剂。
二、存放环境要求
1. 温度控制
- 理想温度：4-30℃(避免冻结或高温导致填料收缩/膨胀)。
- 长期存放时，建议冷藏(如4℃)，但需防止冷冻(水相可能结冰胀裂柱子)。
2. 湿度与避光
- 环境湿度≤60%RH，避免潮湿导致金属接头锈蚀或霉菌生长。
- 避光保存，防止光照引发溶剂分解或固定相结构变化。
3. 防震与防尘
- 平放于稳定台面，避免垂直放置(重力可能导致填料沉降)。
- 使用柱套或保鲜膜包裹柱子，防止灰尘污染接头。
三、密封与溶剂保护
1. 溶剂选择原则
- 反相柱：保存于甲醇、乙腈或甲醇:水(1:1)混合液中，避免纯水导致填料塌陷。
- 正相柱：用正己烷、异丙醇等非极性溶剂密封，严禁接触水分。
- 特殊柱(如手性柱、生物酶柱)：遵循厂商推荐的专用保存液(如含叠氮钠的缓冲液)。
2. 密封方式
- 安装柱堵头或封口螺帽，确保柱床与外界隔绝。
- 若短期存放(<1周)，可保留流动相并密封两端；长期存放需更换新鲜溶剂。
3. 溶剂挥发预防
- 使用高纯度、低挥发性的溶剂(如色谱纯甲醇)，定期检查液面，避免填料干燥。
- 挥发性溶剂(如乙酸乙酯)需密封后置于阴凉处。
四、物理保护与标签管理
1. 防压防弯
- 禁止堆放重物或挤压柱子，避免柱管变形导致流型紊乱。
- 搬运时轻拿轻放，防止碰撞接头。
2. 标签与记录
- 标明柱子型号、填料类型、保存溶剂及存放日期，便于快速识别。
- 记录使用次数、最后一次冲洗溶剂及保存状态，用于追踪性能变化。
五、特殊情况处理
1. 蛋白或生物样品残留
- 用0.5% SDS或尿素溶液冲洗，再依次用高浓度有机溶剂和水交替冲洗，去除蛋白质。
2. 强酸性/碱性溶剂污染
- 立即用中性溶剂(如甲醇)充分冲洗，避免长时间接触pH环境。
3. 盐析堵塞
- 用热水(60℃以下)或稀硝酸冲洗溶解无机盐，随后用纯水和有机溶剂置换。
六、重启使用前的准备工作
1. 平衡柱子
- 安装后，用保存溶剂以低流速(0.2-0.5 mL/min)冲洗15-30分钟，排空气泡并恢复柱温。
2. 梯度测试
- 进行空白梯度测试(如甲醇-水梯度)，检查基线平稳性和保留时间重现性，确认柱效正常。
