在生物样品的制备过程中，提高样品的质量与纯度是至关重要的。免疫亲和柱作为一种高效的样品净化技术，能够特异性地结合并去除样品中的杂质，从而显著提高样品的纯度。
一、原理
基于抗原抗体特异性结合的原理设计。柱内填充有与目标分子特异性结合的抗体或抗原，当样品通过柱子时，目标分子与相应的抗体或抗原结合，形成稳定的复合物。随后，通过洗涤步骤去除未结合的杂质，洗脱目标分子，从而实现对样品的净化与富集。
二、样品制备流程
样品收集与预处理：先收集适量的样品，并根据需要进行预处理，如离心、过滤等，以去除样品中的大颗粒杂质和细胞碎片。
选型与准备：选择与目标分子特异性结合的免疫柱，并按照说明书进行柱子的准备，包括平衡柱子、加入抗体或抗原等。
样品上样：将预处理后的样品缓慢加入免疫柱中，使目标分子与柱子内的抗体或抗原充分结合。
洗涤与杂质去除：用适当的洗涤液冲洗柱子，去除未结合的杂质。洗涤过程中应注意控制流速，避免影响结合物的稳定性。
目标分子洗脱：使用适当的洗脱液将目标分子从免疫亲和柱上洗脱下来。洗脱过程中同样需要控制流速，并收集洗脱液。
样品浓缩与保存：将洗脱后的样品进行浓缩处理，并根据需要进行保存。
三、注意事项
选择合适的免疫亲和柱：根据目标分子的性质和纯度要求选择合适的免疫柱。不同的免疫柱对目标分子的结合能力和特异性有所不同。
控制样品与洗涤液的流速：在样品上样和洗涤过程中，应控制流速，避免影响结合物的稳定性。
洗脱条件的优化：洗脱液的选择和洗脱条件的优化对于提高样品的纯度和回收率至关重要。应根据实际情况进行调整和优化。
