色谱柱是高效液相色谱法中的核心部件,而C18色谱柱作为其中常见的一种类型,具有广泛的应用。然而,对于许多实验员来说,如何正确保养和储存常常是一个挑战。
一、C18色谱柱的保养
1.使用前的准备:使用新的前,建议先用低流速的流动相冲洗20-30倍柱体积,以使色谱柱充分饱和。这一步可以有效提高色谱柱的使用寿命和分离效果。
2.合适的流动相选择:根据待测物的性质选择合适的流动相。强极性物质可使用水-甲醇体系,弱极性物质则可选用乙腈-水体系。避免使用高比例的有机溶剂或高浓度的盐溶液,以免损坏色谱柱填料。
3.柱子的再生:长时间使用后,可能会出现峰变形、分离度下降等问题。此时,可以采用反向冲洗法、阶梯浓度法等技巧对色谱柱进行再生。
4.日常维护:每次使用后,应清洗色谱柱,避免残留物对色谱柱造成损害。同时,定期检查色谱柱是否出现塌陷、裂缝等现象,如有异常应及时更换。
二、C18色谱柱的储存
1.存放环境:应存放在干燥、避光的地方,避免高温和强光直接照射,以保持填料的稳定性。
2.存放温度:色谱柱应存放在室温下,避免温度过高或过低。温度波动会影响色谱柱的性能,导致分离效果下降。
3.存放溶剂:长时间不使用的色谱柱,应将其浸泡在合适的溶剂中。避免干燥和空气暴露,以免填料失活和氧化。