离子对试剂是由强亲水离子形成,反作用于样品分子的中性离子对。因此,可用于同时分离带电分子和非带电分子。反相离子对色谱法是把试剂加入到含水流动相中,被分析的组分离子在流动相中与反离子生成不带电荷的中性离子,从而增加溶质与非极性固定相的作用,使分配系数增加,改善分离效果。
它的种类和浓度对分离效果都有较大的影响种类的选择依赖于被分离样品的性质被分离溶质是强碱,可以是强酸或强碱,弱碱或强酸,弱酸。用于高压液相离子对萃取的液相色谱法分离分析强极性有机酸和有机碱的好方法。广泛应用于生物化学,药物学,和石油化工等领域。
离子对试剂在使用过程中的注意事项:
在分析方法开发中经常使用,分离效果较好,但也有其优缺点,故在日常使用时,应注意一下几个点:
1.对液相色谱柱的影响
多为不挥发的盐,而且很难冲洗干净。使用后的色谱柱容易产生离子对的盐析出,损坏色谱柱。使用过的色谱柱换到其他流动相使用后重现型较差,一般用过使用的色谱柱都是专用,不建议和其他流动相混用。
2.离子试剂体系不稳定
本身没有缓冲能力,其浓度与化合物的保留时间有直接的影响,而且对pH值比较敏感,配制流动相时要求准确度较高。否则直接影响实验的重复性和重现性,系统不稳定。
3.系统平衡时间较长
在流动相和色谱柱之间的平衡时间较长。使用之前需要对色谱柱长时间平衡,梯度方法的平衡要求比较高。