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极性改性反相色谱柱的维护
  • 更新日期:2017-04-11     信息来源:本站      浏览次数:1800
    • 极性改性反相色谱柱使用过程中不能碰撞、弯曲或强烈震动。当柱子和色谱仪连结时,阀件或管路一定要清洗干净。以下从流动相、样品、保护柱等方面提出色谱柱维护应注意的一些问题。
      (1)流动相:流动相使用前必须经脱气和过滤处理。即使仪器配有自动脱气机,也采用超声脱气或其它简便的脱气方法对流动相进行预脱气。尽量避免使用高粘度溶剂(如异丙醇)作为流动相,避免流动相组成及极性的剧烈变化。流动相应尽量使用色谱纯,减少流动相中杂质对色谱柱的污染和对检测器的影响。水用超纯水,流动相用0.45μm或0.22μm的膜过滤。大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2~7.5,硅胶柱pH>8时会发生硅胶溶脱,键合型柱pH<2时会发生键合相断裂,流动相尽量不超过色谱柱的pH范围。普通C18柱尽量避免在40℃以上的温度下分析。柱内不溶物容易引起色谱柱的堵塞,影响样品的分离。不溶物产生的原因是有溶剂的不互溶、样品溶解液和流动相不互溶或者由于温度改变或固定相干涸而产生沉淀。为避免上述问题,要注意溶剂之间的互溶性。若两种溶剂不互溶,需经过中间溶剂慢慢过渡。保存时应将色谱柱两端密封,并尽量保持室温恒定。
       
      (2)样品:对内径5μm的柱子,样品需经0.45μm的膜过滤,更细的柱子要0.22μm的膜过滤。基体比较复杂的样品需经过一定的样品预处理,例如海洋沉积物、中药提取液、体液等,需要采用萃取等方法除去对柱子有损坏的较大杂质,例如色素、多糖、蛋白质等。尽量减少进样量,避免过载。
       
      (3)保护柱:使用预柱作为保护柱,减少污染物对分析柱的损伤。压力升高通常是需要更换预柱的信号。

    北京迪科马科技有限公司(迪马科技)

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