共创共赢
三氯蔗糖又名三氯半乳蔗糖,俗称蔗糖素,由英国泰莱公司(Tate&Lyie)与伦敦大学共同研制并于1976年申请的一种新型甜味剂。由于其具有甜度高(甜度为蔗糖的600倍)、甜味纯正等特点,被认为是目前zui的功能性甜味剂之一,代表了目前强力甜味剂研究的zui高水平。虽然科学家们经过长期的毒理实验证明其具有较高的安全性,但也有三氯蔗糖可诱发偏头疼发作的报道。
建立食品中三氯蔗糖的测定方法,可为食品生产企业提供生产性指导,并为质量监督部门提供食品质量监管依据。我国国家标准《GB 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定》中制定了三氯蔗糖的HPLC-ELSD检测方法。
方法优势:
迪马科技在参考国家标准《GB 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定》基础上,进行了方法优化,推出《食品中三氯蔗糖的测定》方法,该方法:
采用固相萃取-液相色谱法测定食品中的三氯蔗糖,使用ProElut PLS 固相萃取柱净化样品,通过HPLC-ELSD检测;
前处理步骤简单、净化效果好、重现性好,定量限7.5 mg/kg,符合《GB 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定》对三氯蔗糖的*规定;
适用于各省市出入境、质检、疾控、食品药品检验所、第三方检测机构、食品检测机构、大型食品生产商、高校和科研院所等。
以下为详细解决方案,敬请参考!
食品中三氯蔗糖的测定——HPLC法
1、适用范围
本方案适用于液态奶、酸奶、酱油、醋、饼干、奶酪、奶茶、可乐和果冻中三氯蔗糖的检测,方法定量限7.5 mg/kg。
2、标准品配制
标准储备溶液:准确称取标准品,用水配制成10 mg/mL的储备液,吸取一定体积10 mg/mL储备液用水配成浓度为1000 μg/mL的储备液。
3、提取
3.1 含蛋白脂肪类液体:液态奶、酸奶、酱油和醋
10 mL样品,加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸铅溶液,振荡2 min,超声提取5 min,6000 rpm离心5 min,取10 mL上清液,待净化;
3.2 含蛋白脂肪类固体:饼干、奶酪和奶茶
5 g样品,加入8 mL 水和2 mL 200 g/L乙酸铅溶液,振荡2 min,超声提取5 min,6000 rpm离心5 min,取10 mL上清液,待净化;
3.3 饮料:可乐(量取前超声排气泡)
10 mL样品,加入10 mL 水,混匀,取10 mL,待净化;
3.4 果冻
5 g样品,加入5 mL 水,热水超声溶解,混匀,趁热净化。
注:《GB 22255-2014 食品安全国家标准 食品中三氯蔗糖(蔗糖素)的测定》中提取液为75%甲醇水溶液,减压浓缩过程中暴沸严重,不易操作。
4、净化——ProElut 200 mg/6 mL PLS(Cat.#:68012)
(1)活 化: | 依次向柱中加入5 mL甲醇、5 mL水,弃去流出液; |
(2)上 样: | 将待净化液加入柱中,弃去流出液(控制流速不超过每秒1滴); |
(3)淋 洗: (4)洗 脱: | 向柱中加入5 mL 20%甲醇水溶液,弃去流出液; 向柱中加入3 mL甲醇,收集流出液; |
(5)定 容: | 将洗脱液在50 ℃下减压蒸干,用流动相定容至1 mL,供HPLC分析。 |
5、色谱条件
色谱柱:Diamonsil C18(2) 150 × 4.6 mm,5 μm(Cat.#:99601)
流速:1.0 mL/min
进样量:20 μL
柱温:35 ℃
检测器:SEDEX LT-ELSD,温度:40℃,压力:3.5 bar,Gain:6
流动相:A:水;B:乙腈
梯度设置
时间/Min. | 0 | 14 | 15 | 22 | 23 | 30 |
A(%) | 89 | 89 | 10 | 10 | 89 | 89 |
B(%) | 11 | 11 | 90 | 90 | 11 | 11 |
6、添加回收结果
食品中三氯蔗糖的HPLC检测的添加回收结果
添加水平200 mg/kg | 添加水平20 mg/kg | 添加水平7.5 mg/kg | 空白含量(μg/mL) | ||||
回收率(%) | 加标量 | 回收率(%) | 加标量 | 回收率(%) | 加标量 | ||
早餐奶 | 99.01 | 10 mg/mL 200 μL | 109.82 | 1000 μg/mL 200 μL | 96.52 | 1000 μg/mL 75 μL | — |
巧克力奶 | 99.70 | 10 mg/mL 200 μL | 100.91 | 1000 μg/mL 200 μL | 95.88 | 1000 μg/mL 75 μL | — |
咖啡奶 | 100.34 | 10 mg/mL 200 μL | 112.34 | 1000 μg/mL 200 μL | 126.00 | 1000 μg/mL 75 μL | — |
养乐多 | 128.83 | 10 mg/mL 200 μL | — | — | — | — | 130.8 |
酸奶 | — | — | 105.58 | 1000 μg/mL 200 μL | 123.42 | 1000 μg/mL 75 μL | — |
酱油 | 77.85 | 10 mg/mL 200 μL | — | — | — | — | 113.48 |
醋 | 108.22 | 10 mg/mL 200 μL | 143.64 | 1000 μg/mL 200 μL | 205.47 | 1000 μg/mL 75 μL | — |
饼干 | — | — | 102.64 | 1000 μg/mL 100 μL | 103.28 | 1000 μg/mL 37.5 μL | — |
奶酪 | — | — | 88.04 | 1000 μg/mL 100 μL | 82.78 | 1000 μg/mL 37.5 μL | — |
奶茶 | — | — | 101.48 | 1000 μg/mL 100 μL | 169.05 | 1000 μg/mL 37.5 μL | — |
可乐 | — | — | 103.97 | 1000 μg/mL 200 μL | 98.49 | 1000 μg/mL 75 μL | — |
果冻 | — | — | 93.89 | 1000 μg/mL 100 μL | 96.27 | 1000 μg/mL 37.5 μL | — |
食品中三氯蔗糖的测定——HPLC法相关产品信息:
货号 | 名称 | 规格 |
样品前处理 | ||
68012 | ProElut PLS | 200 mg/6 mL, 30/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取装置 | 12位 |
4803 | 1,3,6mL柱管通用连接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正压两用泵,无油 | 1/pk |
99013 | 抽滤瓶套装 (包括硅橡胶管2米,2L抽滤瓶及橡胶塞) | 1/pk |
30039 | FitMax针头式过滤器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 | FitMax针头式过滤器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
标准品 | ||
53-69293-100G | 三氯蔗糖[56038-13-2] | 100 g |
色谱柱及保护柱 | ||
99601 | Diamonsil C18(2) | 150 × 4.6 mm,5 μm |
HPLC溶剂?缓冲盐?离子对试剂 | ||
50101 | 乙腈 HPLC级 | 4 L |
50102 | 甲醇 HPLC级 | 4 L |
通用色谱产品 | ||
52401B | 瓶架/蓝色(现货) | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色(现货) | 50孔 |
1034 | 样品瓶(棕色/螺纹) | 2 mL, 100/pk |
1035 | 样品瓶盖/含垫(已经组装) | 100/pk |
H80465 | HPLC 进样针 | 25 μL |
红色产品货号#30039、#30040、#1034、#1035*